INTRODUCCION

Los signos clínicos observables en los peces, moluscos y crustáceos infectados por cualquiera de las enfermedades de la lista del Código sanitario de animales acuáticos de la OIE (en adelante, Código de animales acuáticos) no siempre son patognomónicos. Es más, puede que los animales padezcan iuna nfección subclínica provocada por los agentes causales de tales enfermedades, i.e. es posible que no muestren signos clínicos.

Por consiguiente, el único enfoque fiable para el diagnóstico de enfermedades de los animales acuáticos es la identificación específica de los agentes patógenos, utilizando métodos de laboratorio. Tales métodos, además de ser apropiados para el diagnóstico de casos aislados de infección como parte de programas nacionales de vigilancia/control sanitario de los animales acuáticos, constituyen el principal contenido del presente Manual de pruebas de diagnóstico para los animales acuáticos (en adelante, Manual de animales acuáticos).

Los mencionados programas de vigilancia tienen por objeto determinar el estado sanitario de las

existencias de animales acuáticos en lugares de producción concretos, incluidas zonas geográficas y países, en base a los resultados proporcionados por procedimientos aplicados en laboratorios de referencia que incluyen la obtención de muestras según reglas preestablecidas. La implementación de los programas de vigilancia/control sanitario de los animales acuáticos precisa de la existencia de legislación y recursos apropiados en cada uno de los países interesados en la sanidad de los animales acuáticos.

Los métodos tratados en el presente manual son métodos de diagnóstico directo. Debido al insuficiente avance de la metodología serológica, la detección de anticuerpos contra patógenos de los peces no se ha aceptado hasta el momento como método rutinario de valoración del estado sanitario de las poblaciones de peces. Los moluscos y los crustáceos no producen anticuerpos como respuesta a una infección. En el caso de los peces, podría producirse en un próximo futuro la validación de algunas técnicas serológicas de diagnóstico, con lo que la serología obtendría mayores índices de aceptación para fines de diagnóstico.

En pasadas ediciones del Manual de animales acuáticos, los únicos métodos de análisis o diagnóstico de enfermedades de peces descritos se basaban bien en el aislamiento e identificación específica del agente patógeno bien en la demostración de antígenos específicos para el agente patógeno mediante la utilización de un método de detección inmunológico. No obstante, en los últimos años, se han perfeccionado de forma progresiva para esos fines técnicas como la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) el uso de sondas de ADN y la hibridación in-situ.

De acuerdo con la experiencia de la última década, es previsible que las técnicas PCR dejen obsoletos a muchos de los métodos clásicos de detección directa del agente infeccioso. Está claro que en muchos laboratorios la PCR está reemplazando al aislamiento de virus o al cultivo de bacterias en la detección de agentes cuyo cultivo resulta difícil o imposible. Existen varias razones que explican esa tendencia; una de ellas es que para el aislamiento de virus se necesita: i) la presencia de los virus replicantes; ii) afrontar el elevado coste de cultivos celulares e instalaciones de mantenimiento; iii) hasta varias semanas para realizar el diagnóstico; y iv) conocimiento experto, que hoy en día es insuficiente o inexistente en muchos laboratorios. Aunque en un principio las pruebas PCR resultaban costosas y difíciles de realizar, en la

actualidad se han convertido en herramientas de laboratorio relativamente baratas, seguras y de fácil utilización. Para los casos en los que la PCR se ha convertido en el método de referencia fiable y estádisponible, el mismo ha sido incluido, junto con los métodos más tradicionales, en el Manual de animales acuáticos. Para las enfermedades de los peces, se recomiendan, en la mayoría de los casos, métodos moleculares tanto para la detección directa del agente patógeno en los peces clínicamente infectados como para la identificación confirmativa del agente patógeno mediante su aislamiento por el método tradicional. Salvo una o dos excepciones, actualmente no se aceptan las técnicas moleculares como procedimientos analíticos para demostrar la ausencia de un agente patógeno específico en las poblaciones de peces a efectos de la obtención de la certificación sanitaria en relación con el comercio internacional de peces vivos y/o productos relacionados. Se requiere un mayor grado de validación de los métodos moleculares con el mencionado fin antes de que puedan ser recomendados en el Manual de animales acuáticos. los principios y métodos de validación y control de calidad de los métodos de la PCR para el diagnóstico de enfermedades de animales acuáticos. Puesto que, en general, para los moluscos y crustáceos no son aplicables los tradicionales métodos de aislamiento del agente patógeno, las técnicas moleculares, sobre todo la PCR, han complementado cada vez más a los tradicionales métodos histológicos y de frotis tisular descritos en el Manual de animales acuáticos, no sólo para el diagnóstico de casos clínicos sino también para el examen de programas destinados a demostrar la ausencia de patógenos de enfermedades específicas a efectos de obtención de la

correspondiente certificación sanitaria.